激光共聚焦扫描显微镜（Confocal Laser Scanning Microscopy, CLSM）是生命科学、材料科学领域的"三维高清相机"。它利用激光逐点扫描样品，通过共轭针孔滤除焦平面外的杂散光，实现光学切片和三维重建，分辨率和信噪比远超普通荧光显微镜。
再好的仪器，也离不开合格的样品。送样前的制备细节直接决定了最终成像质量。今天我们就把各类样品的送样要求一次性整理清楚，帮你避开那些常见的"坑"。
一、菌液/污泥/污水类样品
样品量：
菌液、污泥或污水样品，建议以5000 rpm离心10分钟，得到约绿豆大小的菌体沉淀即可（参考1.5 mL离心管底部的沉淀量）。
量太少信号不足，量太多则容易堆积影响观察。
保存方式：
死活染色/ROS染色的细菌样品：放入加冰袋的泡沫盒中4℃保存，注意样品不要直接接触冰袋，避免冻伤。
蛋白/多糖类染色样品：同样4℃冰袋运输，或用2.5%戊二醛固定后4℃保存，样品与冰袋隔开。
污泥类样品：可选择冰切或刀切处理。
二、生物膜样品
生物膜样品的关键在于保持结构完整和表面平整。
尺寸要求：
金属、瓷砖、岩石等块体类：长宽高建议不超过1 cm；
薄膜类：直径不超过2 cm；
所有样品要求表面平整，并明确标出拍摄面。
保存与运输：
常规生物膜样品用加冰袋的泡沫盒4℃保存，样品不直接接触冰袋。
特殊情况：
如果是在爬片上培养的生物膜，可将爬片粘于培养皿底部，加满培养基，用封口膜完全密封后，再4℃保存运输。
三、植物类样品
植物样品的处理方式取决于组织类型和硬度。
切片方式：
常规植物样品可进行简单冰切或刀切；
软化等特殊处理的样品，建议走病理组织切片测试项目。
保存方式：
加冰袋泡沫盒4℃保存，样品与冰袋隔开，防止冻害。
常见可测样品：
淀粉、胡萝卜、土豆、叶片、根、茎、拟南芥等，我们都有丰富的测试经验。
四、细胞共培养样品
细胞共培养样品分为块体类、液体类和粉末类，要求各不相同。
1.块体类样品（薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等）
送样量：
直接接触作用：每种细胞、每个时间点至少1个样品；
浸提方式：参考国标ISO 10993-12 2007中的浸提方式，根据浸提比例和检测时间点提供相应样品量。
制样要求：
金属块、凝胶类：需制备成统一大小的圆形或方形，建议直径10-15 mm的圆形；
布料、纸片类：可代为裁剪，默认制备直径15 mm的圆片。
2.液体类样品
根据测试浓度和检测时间点确定送样量，建议按单次检测需要量的3-5倍寄送。
若采用稀释后测试，须告知稀释倍数及工作液浓度；
若溶剂为有机溶剂（DMSO、醇类、酚类等），最高工作液浓度中溶剂占比须低于0.5%。
3.粉末类样品
同样按单次检测量的3-5倍寄送，并注意以下细节：
可溶性粉末：注明溶剂种类（无水乙醇、异丙醇、DMSO、培养基、PBS、生理盐水等），如有特殊溶剂需求请随样附上；
不可溶粉末：注明样品性质、灭菌方式，以及分散为均匀悬浮液的必要步骤。
五、注意事项
1. 拍摄参数提前说清楚，送样时请务必提供：
激发/发射波长；
拍摄类型：2D或3D？
拍摄倍数要求。
这些参数直接影响激光共聚焦显微镜的光路设置和扫描策略，提前明确可以大幅提高测试效率。
2. 染色剂信息要明确
请标明染料名称和对应的拍摄条件（激发/发射波长）。如果需要特殊染料，我们可以代购，您也可以自行提供——自行提供的请附带染色使用说明书。
3. 细胞类直接拍摄样品
细胞样品如需直接拍摄，请封片后常温避光邮寄，注意防止玻片破碎。
4. 固体类直接拍摄样品
长宽不超过20 mm；
厚度不超过10 mm；
重量不超过10 g；
务必标出测试面。
5. 微米材料直接拍摄
微米材料先与项目工程师沟通确认可行性，且微粒尺寸不低于5微米。
激光共聚焦显微镜作为高端成像工具，对样品质量要求较高。以上送样规范都是我们在大量实际测试中总结出的经验，照着做能大大提高一次成像成功率，避免返工浪费时间。
如果你的样品比较特殊，或者对制样有疑问，欢迎随时咨询——钧研实验室专注材料表征与生物测试服务，拥有专业的激光共聚焦显微镜平台和经验丰富的技术团队，可以为同学们提供从样品制备到成像分析的全流程技术支持。
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